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1、天然质粒的DNA长度从数千碱基对至数十万碱基对都有。质粒天然存在于这些生物里面,有时候一个细胞里面可以同时有一种乃至于数种的质粒同时存在。质粒的套数(copy number)在细胞里从单一到数千都有可能。有时有些质粒含有某种抗药基因(如大肠杆菌中就有含有抗四环素基因的质粒)。
2、质粒载体多了一个碱基之后会有以下情况发生:大多数菌体质粒都有成千上万对碱基组,多一个碱基并不会有什么影响。但是在特定菌体内或者特定环境下会发生基因突变,将无从翻译,影响其他氨基酸和蛋白质的结合,甚至菌体死亡。
3、大小:质粒的大小通常在1到300千碱基对(kb)之间。多功能性:质粒可以用于多种生物学研究,包括基因克隆、蛋白质表达、基因功能研究等。
4、Kozak序列(针对表达蛋白的载体,而对于L过表达载体,则不需要RNA) 取目的基因CDS区两端15~21个碱基(或反向互补链),加上酶切位点和kozak。当然,这个范围可以放宽。操作步骤:① 在NCBI找到基因序列,***ORIGIN区。
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