有害生物的检疫鉴定

接下来为大家讲解有害生物的检疫鉴定，以及检疫性有害生物官方控制要求是涉及的相关信息，愿对你有所帮助。

简述信息一览：

• 1、苹果茎沟病毒病是怎样检验与检疫的?
• 2、小麦矮腥黑穗病菌检验方法
• 3、葡萄扇叶病毒病是怎样检验与检疫的?
• 4、葡萄金黄化植原体病是怎样检验与检疫的?
• 5、椰子死亡类病毒病是怎样检验与检疫的?
• 6、柑橘衰退病毒病是怎样检验与检疫的?

苹果茎沟病毒病是怎样检验与检疫的?

弗吉尼亚小苹果是苹果茎沟病毒常用的木本指示植物，在苹果健康实生苗上通过二重芽接法进行病毒鉴定。在田间，病株较健株生长矮小并衰弱，叶片色淡。有的病株嫁接口周围肿大，形成1个“小脚”，接合部内有深褐色坏死环纹。木质部表面产生深褐色凹裂沟，严重时从外部即可辨认。

体外稳定性：①钝化温度。55～60℃。②稀释终点。10-2和10-3。③体外存活期。室温下9～24h。血清学关系：该病毒与苹果茎沟病毒和苹果褪绿叶斑病毒无血清学反应，用ELISA法可检测到苹果枝条和树皮中的ASPV。

血清学检测：用cDNA分子杂交法可检测该类病毒（Hadidietal.，1990）。不同症状的病组织，包括锈果、花脸、裂果的病果，以及不显症状的带毒梨树叶，都能检出类病毒，证明这些不同的症状系由同一种类病毒所引起的。

电镜观察：电镜下观察到沿细胞质膜排列的病毒粒子。检疫危险性评价：本病的病原苹果坏死病毒，可通过苹果的繁殖材料进行远距离传播。病树产生系统性坏死叶斑，可给生产一定造成损失。国内尚无发生。季良进行危险性评价时，危险度8分，为中危检疫性有害生物。地理分布：日本。

苹果茎沟病毒和苹果褪绿叶斑病毒，粒体形态虽相似，但在血清学上两者并无亲缘关系。用弗吉尼亚小苹果（Virginia crab）作交叉保护试验，表明该病毒与苹果茎痘病毒亦无亲缘关系。草本寄主中的心叶烟、昆诺藜、苋色藜和菜豆，呈现斑驳、线纹斑、褪绿斑或全身症状。白花曼陀罗、杂种朝彦和克利夫兰烟为无症状侵染。

小麦矮腥黑穗病菌检验方法

对于小麦矮腥黑穗病菌的检验，主要分为症状检查和洗涤检查两种方法。其中，症状检查要求将平均样品倒入无菌白瓷盘内，仔细检查有无菌瘿或碎块，并使用长孔筛或圆孔套筛过筛，挑取可疑病组织在显微镜下检查鉴定。

严格进行***检验，禁止进口和种植带菌的小麦***。2 .带菌的小麦原粮可运往春麦区及不能发病的冬麦区。或加工后调运，麦麸与下脚料进行来菌处理。 选育抗病品种控制病害流行，但病菌生理小种变异快，选育较难。 栽培防治。

小麦矮腥黑穗病***洗涤检验：将检取的检验样品，每份50克分别放到三角瓶内，每个三角瓶加入灭菌水100毫升，加塞后振荡5分钟，立即将悬浮液全部倒出离心；之后弃去上清液，加入数滴席尔氏液，然后取此液和离心沉淀的混合物，制片镜检5个玻片，根据病菌孢子形态加以鉴定。

萌发检验法 小麦矮腥病瘿和小麦网腥病瘿萌发生理特点不同，如需进一步坚定病原，可根据小麦矮腥病瘿在15-17℃是不萌发，在5℃光照下需3-5周萌发，而小麦网腥在以上两种温度下经1-2周后均可萌发的特点来区别坚定病原。

葡萄扇叶病毒病是怎样检验与检疫的?

最常用的是ELISA技术，***用该技术时，葡萄的叶片、休眠枝条韧皮部组织和幼根等均可作为检测材料。该病毒与南芥菜花叶病毒有近缘关系，二者可同时侵染葡萄，因此，***用血清学方法不能将其区分，需借助分子生物学的方法。

木本指示植物。将被检测植株的芽嫁接到指示植物上生物学检测，是目前最可靠的方法。木本指示植物有葡萄品种蜜笋Mission、黑比诺PinotNoir、品丽珠CabemetFrance、赤霞珠CabemetSauvignon、LN33等，表现为明显的卷叶症状，一般需要1～3年的时间（王艳红，1996）。

血清学检测：病毒的免疫原性较好，已得到效价为1/2，048的抗血清。试管试验的沉淀呈颗粒状。凝胶扩散试验形成一条清晰的沉淀带。与可可坏死病毒、番茄黑环病毒有远缘的血清学关系（Kenten，1***2）。

葡萄金黄化植原体病是怎样检验与检疫的?

血清学检测：多克隆和单克隆抗体的血清学技术（ELISA，ISEM）可以用于鉴定草本寄主和叶蝉中的病原体。分子探针正在研究开发，这些方法还未证明对葡萄是可行性的。目测仍是一种常规的方法。

电镜和荧光显微镜观察：以根和茎作材料，进行荧光显微镜观察，在筛管中有荧光反应，根的菌体浓度高于茎，病树含菌体少，仅在靠近形成层的有功能筛管中见到菌体，已病死的筛管中不见菌体（SeemüllerandLederer，1988）。电镜下见到菌体，可确定形态和大小。

电镜观察：用电镜观察，在感病椰子树韧皮部筛管细胞内可见植原体的存在，形状包括丝状、念珠状及近球状，在新近成熟的韧皮部筛管细胞中常见有植原体，而在薄壁组织中未见。分子生物学检测：目前常用核酸杂交、植原体保守序列16srDNA的PCR及嵌套PCR检测技术，以及异源双链迁移率分析（HMA）技术来检测植原体。

血清学检测：ELISA和免疫吸附电镜技术，用来检测桃X病植原体很成功，受检的样品，可以用部分纯化的芹菜提取液，也可以从叶蝉体中提取。最近，已经制得检测X病植原体的单克隆抗体。电镜观察：***用DAPI试剂的简单荧光电镜技术也可用来检测桃和P.virginiana叶片中脉和叶柄中的植原体。

椰子死亡类病毒病是怎样检验与检疫的?

1、纯化的核酸经高压注射器注入到椰子实生苗上，观察是否出现症状，以确证类病毒的存在。（2）分子杂交。CCCVd经克隆或通过PCR扩增后，作为模板，合成与之互补的核酸，然后再用同位素标或生物素标记作为探针，用于杂交试验检测序列和CCCVd相同的分子，是一种十分灵敏的检测方法。（3）电泳杂交。

2、电镜观察：用电镜观察，在感病椰子树韧皮部筛管细胞内可见植原体的存在，形状包括丝状、念珠状及近球状，在新近成熟的韧皮部筛管细胞中常见有植原体，而在薄壁组织中未见。分子生物学检测：目前常用核酸杂交、植原体保守序列16srDNA的PCR及嵌套PCR检测技术，以及异源双链迁移率分析（HMA）技术来检测植原体。

3、检疫危险性评价：本病的病原椰子败生类病毒，可由椰子***远距离传播，介体不知，对椰子生产可构成严重经济损失。季良进行危险性评价时危险度值7分，为中危检疫性有害生物。国内尚未发生，已列入中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录（2007年）。

4、通过观察成虫的特征、分布区域以及寄主特性，可以区分它们与本属其他种类的不同。特别需要注意的是，椰子缢胸叶甲已被我国列入《中华人民共和国进境植物检疫危险***、虫、杂草名录》的二类危险害虫名单。

柑橘衰退病毒病是怎样检验与检疫的?

1、鉴别寄主：一些柑橘类植物的实生苗，对衰退病毒反应灵敏，可以作为鉴定的指示植物。酸橙实生苗：进行检测时，可将待测植物的芽或茎，嫁接到酸橙幼苗上，置18～25℃的温室培养，2～6个月后，症状表现为典型的明脉和茎陷。这种检测方法虽然费用高、时间长，但是非常灵敏和专一。

2、①严格执行检疫，防止病菌传入。②不用带病接穗繁殖。可以通过指示植物（如墨西哥来檬）鉴定，选择无病母株。也可经过热处理，用50℃湿热空气处理7～22小时后嫁接。③选择抗病砧木，如酸橘、江西红橘等。④加强栽培管理，避免水害、旱害、蚜虫为害和营养不足等。

3、衰退病病原是一种病毒，线状，2000×10—12nm。根据寄主所表现的症状严重程度区分，衰退病毒有致病力强弱不同的株系。

4、柑橘衰退病毒病：病原是柑橘速衰病毒（CTV）。

5、发病条件：衰退病的传播途径是通过带毒的苗木和带毒的芽、皮和叶碎片嫁接传染，在田间主要通过褐色橘蚜、棉蚜、橘二叉蚜、绣线菊蚜、桃蚜等蚜虫传播，其中褐色橘蚜的传病力最强。

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